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菌落總數(shù)檢測

1、為什么平板計數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH？

由于大部分細菌是嗜中性的，培養(yǎng)基為符合細菌生長要求，需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環(huán)境，確保檢測結(jié)果的準確性。

2、如何保證檢測結(jié)果的有效性？

設(shè)計空白對照

（1）檢驗過程中需要做空白對照，用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完美的空白試驗平板上應(yīng)該無細菌生長。

實驗環(huán)境要求

（2）定期檢測空氣潔凈度，判斷實驗環(huán)境是否符合標準要求。

滅菌處理

（3）細菌檢測過程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過滅菌程序。

3、如何提高檢測結(jié)果的準確性？

樣品消毒

（1）任何樣品在打開包裝，都要在取樣開口處的周圍表面進行消毒。

（2）采樣時對于易堵塞吸管的樣品（如糕點面包辣條等），可以放置一塊無菌紗布在放樣液的容器瓶口下方，作過濾用。

稀釋度選擇

（3）不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出限量也不一致，通常糕點類樣品中細菌量偏低，稀釋度應(yīng)選擇較小的，稀釋度可選1:10 。

4、為什么瓊脂凝固后需要倒置？

平板倒置培養(yǎng)，可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細菌生長，又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計數(shù)。

5、為什么培養(yǎng)基干裂？

干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導致，通常2種原因：

（1）培養(yǎng)箱內(nèi)部溫度不穩(wěn)定導致；

（2）培養(yǎng)基倒得太薄。

6、菌落蔓延的原因及解決辦法？

菌落蔓延主要有兩個原因，一是操作不當；二是樣品中含有變形桿菌等運動性強的細菌。

操作中需要注意3個關(guān)鍵點：

（1）傾注培養(yǎng)基時搖晃平皿使其混合均勻，減少菌塊；

（2）樣品稀釋后，盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時間控制在30分鐘之內(nèi)，避免樣液干涸造成菌落成團；平板凝固后馬上倒置；

（3）若樣品中含有變形桿菌，則可以覆蓋一層培養(yǎng)基（約4mL）。

7、異常現(xiàn)象平板如何進行菌落計數(shù)？

在完成培養(yǎng)后應(yīng)立即進行計數(shù)，通常選取30-300CFU菌落數(shù)、無蔓延菌落生長的平板作為計數(shù)，但實際操作中會出現(xiàn)各種異�，F(xiàn)象。

另外，當所有稀釋度的平板均無細菌生長，則檢測報告應(yīng)以低稀釋度報出，如低稀釋度為1，則報為＜1；若低稀釋度為1:10，則報為＜10，而不能報為「未檢出」。