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1.混有蛋白：不要使用過多菌體。經(jīng)溶液P1、P2、P3處理，離心后溶液應(yīng)為澄清的，如果還混有微小蛋白懸浮物可再次離心去除后再進(jìn)行下一步驟。

2. 混有RNA：RNaseA處理不徹底，請減少菌體用量或加入溶液P3之后室溫放置一段時(shí)間。如果溶液P1已保存6個(gè)月以上，請?jiān)谌芤篜1中添加RNaseA。

3. 混有基因組DNA：加入溶液P2和P3后應(yīng)溫和混勻，如果劇烈振蕩，可能把基因組DNA剪切成碎片從而混雜在質(zhì)粒中。如果加入溶液P2后過于粘稠，無法溫和混勻，請減少菌體用量。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞和DNA的降解，培養(yǎng)時(shí)間不要超過16小時(shí)。

4. P3溶液加入時(shí)間過長：P3溶液加入后，放置時(shí)間不要太長，否則有可能會(huì)產(chǎn)生小片段DNA污染。

5. 含大量核酸酶的宿主菌：宿主菌含大量核酸酶，在質(zhì)粒提取過程中降解質(zhì)粒DNA，影響提取質(zhì)粒DNA的完整性，好選用不含核酸酶的大腸桿菌宿主菌，如DH5α和Top10。

6. 質(zhì)粒的二聚體和多聚體形式：質(zhì)粒復(fù)制過程中形成的，與宿主菌相關(guān)，電泳可檢測出多條條帶，單酶切處理后可變成單一條帶。

處理提示：

1、購買后，請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)。

2、做好預(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制。

3、在使用再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)。做好必要的安全對(duì)策。

4、對(duì)沒有標(biāo)明其危險(xiǎn)特性，有害特性的，也要慎重地進(jìn)行操作。

5、必須戴好防護(hù)用具，小心翼翼進(jìn)行操作。

6、請參照相關(guān)法規(guī)，文獻(xiàn)，MSDS等信息，理解并掌握好試劑的特性，再進(jìn)行安全操作。

7、通常購買試劑時(shí)要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話，要更加注意其保管和管理。

8、萬一試劑操作者并非業(yè)技術(shù)人員。必須在業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。

9、對(duì)于使用后的廢棄物，不要或舊的試劑，應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。