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1.準(zhǔn)備好所有試驗(yàn)額定所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；
 

2.依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量；

 

3.按闡明書將所用試劑平衡至室溫，制造所需試劑；

 

4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法試驗(yàn)者，留意低溫保存。

試驗(yàn)中為了確認(rèn)信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書慣例供給的范圍進(jìn)行操作。

規(guī)范品的制造：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書，留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。依據(jù)每批闡明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。

為了優(yōu)化靈敏度，主張過(guò)夜孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運(yùn)用過(guò)氧化物酶作為顯色體系，應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，主張?jiān)跇?biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。

常見問(wèn)題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍；
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題：在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候，會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況，這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí)，然后在進(jìn)行離心處理；
3、洗板時(shí)容易造成誤差： 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹�，所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的，這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)；
4、顯色問(wèn)題： 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng)，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈；
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。