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    現(xiàn)如今，ELISA實驗樣本已不僅僅局限于血清、血漿組織了，更多時候廣大科研者開始提取腦脊液作為研究對象。那么，腦脊液該如何提取跟保存呢？假如您心中也帶著這個疑惑，那么請跟隨我司技術(shù)部王老師一起獲知其中的奧秘吧！

    腦脊液的采集

    1.狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法：動物輕度麻醉后，側(cè)臥位固定，使頭部及尾部向腰部盡量彎曲，剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚，右手持腰穿刺針垂直刺入，當(dāng)有落空感及動物的后肢跳動時，表明針已達(dá)椎管內(nèi)（蛛網(wǎng)膜下腔），抽去針芯,即見腦脊液流出。如果無腦脊液流出，可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針方向及角度，如果腦脊液流的太快，插入針芯稍加阻塞，以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。

    2.大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法

    在大鼠麻醉后，頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒，用手術(shù)刀沿縱軸切一縱行切口（約2cm）用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血，*深層附著在骨上的肌肉用手術(shù)刀背刮開，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉，防止感染。采完腦脊液后，應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水，以保持原來腦脊髓腔的壓力。

    腦脊液的保存條件

    1.如果實驗要求只是測定其中的蛋白含量的話，采集腦脊液后，離心1500g（左右）/10min（左右）。然后收集上清，分裝保存于液氮[*佳選擇]或-80度即可。（如果短時間內(nèi)就使用，-20度也可以，但能保存于-80度）。整個過程是冰上操作。

    2.保存過程中，避免反復(fù)凍溶，防止蛋白降解。



    標(biāo)簽：腦脊液 ELISA樣本


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