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【細(xì)胞培養(yǎng)基】常用的添加成份及使用注意事項
閱讀次數(shù):10 發(fā)布時間:2025/5/19 9:43:32
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酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進(jìn)行測定。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響,也可通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長。

碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標(biāo)準(zhǔn)、安全量,是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實踐經(jīng)驗所得。但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同,同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等),且存在的地域性水質(zhì)差異等,在實際生產(chǎn)過程中也可稍作改動,但使用者需做相應(yīng)的檢測(理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗等)。

HEPES是一種非離子緩沖液,在pH 7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34 g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10~25 mmol/L。

丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是在沒有葡萄糖的條件下,細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。

谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,使用中好單獨(dú)配制,置-20℃冰箱中保存,使用加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。

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