真菌檢驗(yàn)基本上可分為培養(yǎng)技術(shù)和非培養(yǎng)技術(shù)兩大類。非培養(yǎng)技術(shù)又分為顯微鏡檢查技術(shù)、生化免疫檢查技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)。者是直接觀察真菌形態(tài)，其中組織病理學(xué)檢查為侵襲性真菌感染診斷的金-標(biāo)準(zhǔn)；后者是檢測真菌的抗原、
抗體和核酸。這些技術(shù)的綜合使用可大大地提高侵襲性真菌感染診斷的準(zhǔn)確性。
常見真菌檢驗(yàn)技術(shù)
其中直接檢查、分離培養(yǎng)和病理組織檢驗(yàn)為傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法。而血清學(xué)真菌抗原抗體檢查以及真菌核酸檢測均為近些年發(fā)展起來的新技術(shù)、新方法，這些新方法不需要對標(biāo)本中真菌進(jìn)行培養(yǎng)，從而檢測周期短、檢測方法簡便，越來越受到臨床的歡迎。
1、真菌顯微鏡檢查
顯微鏡檢查是重要、基本的檢查方法。發(fā)現(xiàn)真菌的有形成分如菌絲、假菌絲或較多孢子往往提示真菌感染，臨床上具有診斷價(jià)值。但是，見到菌絲孢子并不能確定真菌的種類。直接鏡檢對于淺表和皮下真菌感染有幫助。陽性結(jié)果可確定真菌感染，而陰性結(jié)果不能排除診斷，主要原因與取材是否合格，標(biāo)本處理是否得當(dāng)有關(guān)，1次取材直接涂片法的漏診率高達(dá)45%。如果在無菌體液中發(fā)現(xiàn)真菌成分�？纱_定診斷，但在有菌部位則只有發(fā)現(xiàn)大量菌絲才有診斷意義。通過直接鏡檢一般可區(qū)分念珠菌、隱球菌和毛霉菌等，但進(jìn)一步明確菌種需要通過培養(yǎng)鑒定來完成。
2、分離培養(yǎng)與鑒定技術(shù)
目引起深部真菌病的主要為念珠菌、曲霉菌和新型隱球菌，如分離出新型隱球菌、紅色毛廯菌等致病菌時(shí)診斷可以確定，而分離出條件致病菌如白念珠菌或煙曲霉，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行判斷，而對于孢子絲菌取膿液、組織塊作真菌培養(yǎng)，鑒定菌種即可確診。
無菌標(biāo)本如血液、腦脊液和腹水分離出的條件致病菌常提示明確的感染，但來自痰、咽拭子、膿液以及尿標(biāo)本分離出的條件致病菌則應(yīng)慎重解釋結(jié)果。任何一株培養(yǎng)結(jié)果都不能輕易視為污染。
標(biāo)本直接鏡檢的結(jié)果往往可以解釋培養(yǎng)的菌種，應(yīng)強(qiáng)調(diào)直接鏡檢與培養(yǎng)檢查相結(jié)合的重要性。
3、組織病理學(xué)
組織病理學(xué)檢查是侵襲性真菌病診斷的金-標(biāo)準(zhǔn)。通過組織病理學(xué)檢查可確定真菌的種、屬，如隱球菌、念珠菌、曲霉、著色真菌等。如用特殊染色可提高陽性率。但確切的菌種還需要真菌培養(yǎng)確定，二者相互補(bǔ)充。
真菌在組織內(nèi)一般表現(xiàn)為:
孢子：酵母和雙相型真菌在組織內(nèi)表現(xiàn)為孢子；
菌絲：許多真菌在組織中只表現(xiàn)為菌絲。組織中發(fā)現(xiàn)無色分隔、分支的菌絲多為念珠菌和曲霉。粗大、不分隔、少分支的菌絲為接合菌，多為毛霉、根霉、犁頭霉等。粗大、少分支、有隔的菌絲為蛙類真菌。棕色菌絲為暗色絲孢霉病，由暗色孢科真菌引起；
菌絲和孢子主要見于念珠菌感染；
顆粒為組織內(nèi)有菌絲形成的團(tuán)塊；
球囊獲內(nèi)孢囊球囊內(nèi)含有內(nèi)孢子，為球孢子菌或鼻孢子菌在組織內(nèi)的特征性結(jié)構(gòu)。
4、真菌非培養(yǎng)檢驗(yàn)技術(shù)
真菌非培養(yǎng)檢驗(yàn)技術(shù)既是一門傳統(tǒng)的技術(shù)，也是一門新興的技術(shù)。就傳統(tǒng)而言，顯微鏡直接檢查和組織切片檢查都屬于此類，而有關(guān)真菌結(jié)構(gòu)或抗原檢查、抗體檢查和核酸檢查則屬于后一類。例如，現(xiàn)在應(yīng)用廣泛，并已經(jīng)作為侵襲性真菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)的G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)以及隱球菌抗原檢查均屬于新興的真菌檢驗(yàn)的非培養(yǎng)技術(shù)。其中G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)-具有代表性
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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