細胞培養(yǎng)實驗中，培養(yǎng)基有著不可取代的地位。大家知道，血清是的天然培養(yǎng)基，而無血清培養(yǎng)基也有著功不可沒的作用，被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆
抗體，病毒抗原和重組
蛋白等。遠慕生物為您分析解說無血清培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)實驗中的適應(yīng)性：
一、適應(yīng)方法
1.直接適應(yīng)細胞從血清的培養(yǎng)基為基。
2.連續(xù)的適應(yīng)或脫機細胞從血清的培養(yǎng)基為SFM在幾個步驟。
連續(xù)的適應(yīng)往往是細胞比直接適應(yīng)嚴酷少。
二、連續(xù)的適應(yīng)
通道1，75%血清的培養(yǎng)基：25%基
通道2，50%血清的培養(yǎng)基：50%基
通道3，25%血清的培養(yǎng)基：75%基
從75%到100%的變化可能是太緊張的SFM細胞，可能需要把細胞2–3通道在10%血清的培養(yǎng)基：90% SFM混合物。大多數(shù)的細胞系可以被認為是完-全適應(yīng)后100% SFM 3通道。有時你可能會得到你過去的某一步甚至細胞之100% SFM有麻煩。如果發(fā)生這種情況，回去和傳代細胞2–3次血清比補充媒體的無血清培養(yǎng)基。
三、對無血清培養(yǎng)的思考
總的來說，在無血清培養(yǎng)細胞的滲透壓，pH，溫度，機械力端敏感，酶處理。
1.抗生素
不要在無血清培養(yǎng)基中使用抗生素。如果你這樣做，我們建議您使用5到10倍不到你會在血清培養(yǎng)基中。這是因為血清蛋白會結(jié)合一定量的抗生素添加；沒有這些血清蛋白抗生素的水平可能是某些細胞的毒性。
2.高密度
細胞必須與活力> 90%適應(yīng)中的生長對數(shù)期。連續(xù)的適應(yīng)可能是必要的。播種文化在一個更高的密度比正常在各通道在SFM適應(yīng)可以幫助過程。因為有些部分的細胞不可能在新的文化環(huán)境中生存，有更多的細胞會增加活細胞數(shù)進一步通道。
3.叢生
細胞聚集往往發(fā)生在適應(yīng)SFM。我們建議你輕輕地成團塊打破他們當傳代細胞。
4.形態(tài)
這是不尋常的在適應(yīng)SFM后見細胞形態(tài)略有變化。只要倍增時間和細胞活性保持良好，在形態(tài)上的細微變化，不應(yīng)該是一個值得關(guān)注的理由。
四、對培養(yǎng)的適應(yīng)
為適應(yīng)SFM的另一種方法涉及使用“條件培養(yǎng)基”。介質(zhì)的細胞已生長在一個完整的通道，如果您選擇這種方法，可以促進適應(yīng)如下：
通道1，100%血清的培養(yǎng)基
通道2通道50%中從1:50左右SFM
通道3通道50%中從2:50左右SFM
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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