免疫學(xué)技術(shù)：是指在免疫學(xué)長/期發(fā)展過程中形成的一套獨特的研究手段和計數(shù)，包括人工免疫防治技術(shù)（疫苗和血清）和免疫檢測技術(shù)（抗原
抗體檢測和機體免疫功能檢測）
免疫學(xué)研究涉及到的重要技術(shù)包括：單克隆抗體技術(shù)、T細(xì)胞克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)基因及基因編輯技術(shù)、分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)等。
常用的免疫學(xué)技術(shù)：1．免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)是利用熒光素標(biāo)記的抗體（或抗原）檢測組織、細(xì)胞或血清中的相應(yīng)抗原（或抗體）的方法.由于熒光抗體具有安全、靈敏的特點,因此已廣泛應(yīng)用在免疫熒光檢測和流式細(xì)胞計數(shù)域.根據(jù)熒光素標(biāo)記的方式不同,可分為直標(biāo)熒光抗體和間標(biāo)熒光抗體.間標(biāo)熒光抗體中一抗并不直接連接熒光素,而是先將一抗結(jié)合到蛋白,然后帶有熒光素的二抗再結(jié)合至一抗.通過二抗的結(jié)合,能將信號進行放大,因此能在一定程度上提高檢測的靈敏度,但是隨之帶來的高背景也降低了檢測的特異性.近年來,隨著熒光素和熒光檢測技術(shù)的不斷進/步,熒光檢測的靈敏度已經(jīng)接近同位素檢測的水平,直接標(biāo)記的熒光抗體逐漸取代間接標(biāo)記抗體.這些標(biāo)記了熒光素的抗體直接結(jié)合至抗原,大大提高了檢測的特異性,使檢測的結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠.熒光檢測技術(shù)的發(fā)展,使得免疫熒光技術(shù)在傳染病診斷上有廣泛的用途,如在細(xì)菌、病毒、螺旋體感染的疾病,檢查IgM抗體,做為近期接觸抗原的標(biāo)志.利用單克隆熒光直接標(biāo)記抗體鑒定淋巴細(xì)胞的亞類.通過流式細(xì)胞儀,針對細(xì)胞表面不同抗原,可以同時使用多種不同的熒光抗體,對同一細(xì)胞進行多標(biāo)記染色.
2．放射免疫檢測放射免疫檢測技術(shù)是目靈敏度/高的檢測技術(shù),利用放射性同素標(biāo)記抗原（或抗體）,與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合后,通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射性檢測結(jié)果.放射性同位素具有pg的靈敏度,且利用反復(fù)曝光的方法可對痕量物質(zhì)進行定量檢測.但放射性同位素對人體的損傷也限制了該方法的使用.
3．酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）酶聯(lián)免疫檢測是目應(yīng)用廣泛的免疫檢測方法.該方法是將二抗標(biāo)記上酶,抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶催化底物的作用結(jié)合起來,根據(jù)酶作用底物后的顯色顏色變化來判斷試驗結(jié)果,其敏感度可達ng水平.常見用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶（AP）等.由于酶聯(lián)免疫法無需特殊的儀器,檢測簡單,因此被廣泛應(yīng)用于疾病檢測.常用的方法有間接法、夾心法以及BAS－ELISA.間接法是先將待測的蛋白抱被在孔板內(nèi),然后依次加入一抗、標(biāo)記了酶的二抗和底物顯色,通過儀器（例如酶標(biāo)儀）定量檢測抗原.這種方法操作簡單但由于高背景而特異性較差.目已逐漸被夾心法取代.夾心法利用二種一抗對目標(biāo)抗原進行捕獲和固定,在確保靈敏度的同時大大提高了反應(yīng)的特異性.近年來,抗原的定量檢測技術(shù)也不斷推陳出新.近年來,在夾心法ELISA的基礎(chǔ)上,開發(fā)了多抗原檢測試劑盒,能同時檢測微量液相樣本中多個抗原含量.這項技術(shù)的應(yīng)用大大縮短了診斷的時間,提高診斷的可靠性和及時性.
4．免疫金膠體技術(shù)膠體金技術(shù)經(jīng)過30多年的發(fā)展到現(xiàn)在已日趨成熟,該方法是將二抗標(biāo)記上膠體金顆粒,利用抗原抗體間的特異性反應(yīng),終將膠體金/標(biāo)記的二抗吸附于滲濾膜上,此方法簡單,快速,廣泛應(yīng)用于臨床篩查.
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原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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