麻豆国产一区二区三区,亚洲香蕉5,一级二级国产在线,熟妇的惨叫

    上海遠(yuǎn)慕生物：單克隆抗體鑒定  抗體

    對制備的McAb進(jìn)行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述幾個方面的鑒定：

    1．抗體特異性的鑒定

    除用免疫原（抗原）進(jìn)行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其它抗原進(jìn)行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細(xì)胞的McAb，除用黑色素瘤細(xì)胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其它臟器的腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞進(jìn)行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組的細(xì)胞因子的單克隆抗體，應(yīng)首先考慮是否與表達(dá)菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其它細(xì)胞因子間有無交叉。

    2．McAb的Ig類與亞類的鑒定

    一般在用酶標(biāo)或熒光素標(biāo)記的第二抗體進(jìn)行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標(biāo)或熒光素標(biāo)記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標(biāo)準(zhǔn)抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴(kuò)或夾心ELISA來確定。在作雙擴(kuò)試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。

    3．McAb中和活性的鑒定

    用動物或細(xì)胞的保護(hù)實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細(xì)胞，來觀察動物或細(xì)胞是否得到抗體的保護(hù)。

    4．McAb識別抗原表位的鑒定

    用競爭結(jié)合試驗，測相加指數(shù)的方法，測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。

    5．McAb親合力的鑒定

    用ELISA或RIA競爭結(jié)合試驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親合力。

    多克隆抗體的制備

    一般包括以下幾個步驟：

    1、制備抗原。

    2、選擇實驗動物。

    3、動物免疫。

    4、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫。

    5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

    6、純化出抗體。

    7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司